食品中荧光假单胞菌双重PCR法检测体系的建立和评价

• 作者: 刘振民 徐煜 游春苹 陈万义 高琳
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 荧光假单胞菌 gyrB基因 apr基因 双重PCR 食品检测
• 年，卷（期）: 2016,（15）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 294-299,303
• 分类号: TS252.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.15.048

摘要

根据荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)促旋酶(gyrase)的B亚单位基因以及金属蛋白酶(apr)基因设计出两对引物,经过反应条件的优化,建立了用于荧光假单胞菌快速检测的双重聚合酶链式反应(PCR)方法,并对该体系进行评价.结果显示,Pseudomonas fluorescens菌株经普通PCR扩增均可见2条特异性条带(384 bp和194 bp),而其它阴性对照菌株PCR扩增均为阴性.基于基因组DNA的双重PCR检测灵敏度为16.9 fg/μL(3～4拷贝/μL),1.8CFU/mL的UHT牛奶样品(250 mL)经增菌24 h后用该双重PCR方法均可检出.本研究建立的双重PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏度,能克服乳制品样品基质的干扰,可应用于乳制品中荧光假单胞菌的快速检测.