利用RNAi抑制cre1基因转录提高里氏木霉表达纤维素酶

• 作者: 姚斌 宫莉 张永杰 王榕 罗会颖 苏小运 薛鲜丽
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: cre1 RNAi 纤维素酶 DNA assembler
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 189-194
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.11.031

摘要

本研究采用RNA干扰技术(RNAi)对里氏木霉主要的转录抑制因子cre1基因的表达进行抑制,以期提高里氏木霉生产纤维素酶的能力.通过PCR,从里氏木霉的基因组中扩增得到cbh1启动子、反向的cre1基因片段(568～963 bp)、正向的cre1基因片段(655～961 bp)和cbh2终止子,利用DNA assembler方法将这些基因连接到pRS424质粒上,构建成pCre1-i质粒.再将RNAi盒分作两个片段扩增,同时转化里氏木霉并通过PCR鉴定阳性转化子.摇瓶发酵显示其中一株转化子在纤维素诱导培养基中培养4.5 d后,其纤维素酶的滤纸酶活、内切葡聚糖酶活和CBHI酶活为0.67、3.70和0.46 U/mL,较出发菌株分别提高了1.3、1.8和5.6倍.通过实时荧光RT-PCR检测,发现该转化子中cre1 基因的转录水平比出发菌株降低了43％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
3	王榕	山西大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0
7	宫莉	中国农业科学院饲料研究所	1	3	1.0	1.0
8	薛鲜丽	中国农业科学院饲料研究所	1	3	1.0	1.0
9	张永杰	山西大学生命科学学院	18	227	6.0	15.0
10	苏小运	中国农业科学院饲料研究所	7	7	2.0	2.0