小鼠miR-29c过表达慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 徐渴 曾强 王凤山 王欣
• 来源期刊: 环境与健康杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-29c 慢病毒 载体构建 MLE-12细胞 293T细胞
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 基础与应用
• 页码范围: 965-968,封3
• 页数: 5页
• 分类号: R994.6
• 字数: 3661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2017.11.006

摘要

目的 构建小鼠miR-29c过表达重组慢病毒载体,并对表达产物进行鉴定.方法 应用PCR法从小鼠MLE-12细胞中提取pre-miR-29c基因,测序后将其克隆到pLenti-CMV-EGFP慢病毒载体,通过PCR筛选及测序对阳性克隆进行鉴定.将miR-29c过表达慢病毒载体转染至293T细胞,进行慢病毒的包装和滴度测定.以RT-PCR检测慢病毒转染MLE-12细胞中miR-29c的表达量.结果 构建miR-29c慢病毒表达载体Lv-miR-29c经PCR和测序鉴定正确,并获得滴度为5.65× 108 IU/ml的病毒浓缩液,转染MLE-12细胞后miR-29c基因成功过表达.结论 成功构建miR-29c过表达慢病毒载体,为进一步研究miR-29c的功能奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾强		110	566	13.0	17.0
2	王凤山		21	106	6.0	9.0
3	王欣		33	140	6.0	10.0
4	徐渴	天津医科大学公共卫生学院	4	17	2.0	4.0