GST-hSesn2融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

• 作者: 付勤 巴根 李妍 杨蕾 沈涛 郭洲洋 郭然 陈之光
• 来源期刊: 解剖科学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Sesn2 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 31-33,37
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.16695/j.cnki.1006-2947.2017.01.009

摘要

目的 构建GST-hSesn 2融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 从COS-7细胞中提取mRNA,反转录为cDNA.用PCR方法扩增出hSesn2基因全长,通过BamHI和Satl酶切位点将其定向插入pGEX-4T-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-hSesn2,并转化E.coli DH5α,通过限制性内切酶酶切电泳和DNA测序鉴定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷大量诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定.结果 酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒GST-hSesn2,并用Western blot方法证实了GST-hSesn2融合蛋白在原核细胞大肠埃希菌中阳性表达.结论 GST-hSesn2原核表达载体成功构建为进一步纯化Sesn2及研究其结构与功能提供了前提基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李妍		134	553	12.0	18.0
2	付勤		182	1030	16.0	22.0
3	郭然		9	24	2.0	4.0
4	沈涛		27	129	5.0	11.0
5	巴根		20	78	5.0	8.0
6	杨蕾		56	176	8.0	10.0
7	陈之光		19	78	4.0	8.0
8	郭洲洋		3	0	0.0	0.0