牛mettl3基因的原核表达与蛋白纯化

• 作者: 于萌萌 刘丽杰 李冬 李姗姗 陈东莹 高学军
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛 METTL3 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 5072字
• 语种: 中文

摘要

m6A甲基转移酶(methyltransferase-like protein 3,METTL3)可调控mRNA的m6A甲基化水平,调节细胞蛋白质合成,实验室前期发现METTL3为乳腺上皮细胞乳合成重要调节分子,发挥泌乳调节作用.目前尚不清楚METTL3分子结构基础及其参与的调节机制.为揭示METTL3结构与功能关系,对METTL3蛋白作原核表达及纯化.研究采用PCR方法扩增牛mettl3基因完整CDS区,将CDS区插入原核表达载体pGEX-4T-1,异丙基硫代书-D-半乳糖苷(IPTG)诱导METTTL3蛋白大量表达,用8 mol·L-1尿素裂解包涵体,利用GST蛋白纯化试剂盒纯化诱导获得METTL3蛋白.SDS-PAGE证实GST-METTL3融合蛋白存在于包涵体内,试验获得高纯度GST-METTL3融合蛋白,为进一步研究METTL3蛋白在奶牛泌乳中作用提供重要依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高学军	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	183	1315	18.0	27.0
2	刘丽杰	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	11	102	4.0	10.0
3	陈东莹	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	2	3	1.0	1.0
4	李冬	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	4	6	2.0	2.0
5	李姗姗	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	4	6	2.0	2.0
6	于萌萌	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	4	6	2.0	2.0