小鼠pMSV-Slfn5-GFP表达质粒构建及基因结构分析

• 作者: 况春燕 杨藩
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: pMSV-Slfn5-GFP 构建 基因结构 分析
• 年，卷（期）: 2017,（22）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 3033-3035
• 页数: 3页
• 分类号: Q331
• 字数: 3158字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2017.22.003

摘要

目的 构建小鼠pMSV-Slfn5-GFP基因重组表达质粒及基因结构分析.方法 提取小鼠肝脏组织中总RNA,反转录为cDNA.PCR扩增小鼠Slfn5编码序列片段,并与pGEM-T Easy载体连接,连接产物转化到大肠埃希菌DH5α中.挑取阳性克隆提取质粒,经限制性内切酶H pα工和Xho Ⅰ双酶切鉴定.酶切鉴定正确的质粒送Macrogen USA测序.测序正确的质粒通过HindⅢ和XhoⅠ与pMSV-GFP连接,并命名为pMSV-Slfn5-GFP.通过UCSC(http://genome.ucsc.Edu/)分析小鼠Slfn5及其家族基因组结构,并通过NCBI确定Sgn5的蛋白结构域.结果 Slfn5全长基因序列克隆到表达载体pMSV-GFP中,酶切鉴定片段大小为2.65 kb.Slfn5的AAA_4蛋白结构域由phylogeny.fr确定了该结构在Slfn蛋白家族中的保守性.结论 成功构建了小鼠pMSV-Slfn5-GFP全长基因表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	况春燕	贵州省人民医院心内科	10	22	3.0	4.0