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微生物谷氨酰胺转氨酶催化细胞色素c赖氨酸残基的定点修饰
微生物谷氨酰胺转氨酶催化细胞色素c赖氨酸残基的定点修饰
作者:
吴文倩
周建芹
张宸
陈韶华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
谷胺酰胺转氨酶
细胞色素c
定点修饰
摘要:
研究微生物谷氨酰胺转氨酶(mTG)催化细胞色素c(Cyt c)的PEG定点修饰的可行性,并优化修饰条件,研究PEG修饰对Cyt c性质的影响.将单甲氧基聚乙二醇氨(mPEG-NH2)与N-苄氧羰基-谷氨酰胺-甘氨酸(CBZ-QG)共价结合制备含谷氨酰胺残基的甲氧基聚乙二醇衍生物(N-苄氧羰基-谷氨酰胺-甘氨酰-单甲氧基聚乙二醇,CBZ-QG-mPEG);mTG分别催化mPEG-NH2、CBZ-QG-mPEG (mTG)修饰Cyt c,研究酶法定点修饰Cyt c残基的可行性;改变酶的用量、温度、反应时间和pH等反应条件优化谷胺酰胺转氨酶催化修饰Cyt c的条件.研究结果表明:①mPEG-NH2不能作为mTG的底物修饰Cyt c,甲氧基聚乙二醇氨(mPEG-NH2)分子上引入谷氨酰胺残基后,在mTG的催化作用下了实现Cyt c的PEG修饰,而且基于mTG的底物特异性实现了PEG定点修饰Cyt c的赖氨酸(Lys)残基;②37℃温度下,pH 8.0的溶液中,1mg/ml的mTG催化修饰反应2h是最佳修饰反应条件;③化学法PEG修饰Cyt c产物复杂,是多种多点修饰产物的混合物,酶法催化PEG修饰Cyt c只产生单一产物;④与天然Cyt c相比,修饰后Cyt c的活力、稳定性都有所提高.提出的谷胺酰胺转胺酶催化修饰法解决了蛋白质Lys残基难以定点修饰的难题,拓展了mTG在蛋白质修饰方面的应用.
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文献信息
篇名
微生物谷氨酰胺转氨酶催化细胞色素c赖氨酸残基的定点修饰
来源期刊
中国生物工程杂志
学科
生物学
关键词
谷胺酰胺转氨酶
细胞色素c
定点修饰
年,卷(期)
2017,(9)
所属期刊栏目
技术与方法
研究方向
页码范围
82-88
页数
7页
分类号
Q814.9
字数
语种
中文
DOI
10.13523/j.cb.20170911
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
陈韶华
苏州大学医学部实验中心
39
139
7.0
10.0
2
吴文倩
苏州大学医学部实验中心
19
108
7.0
10.0
3
周建芹
苏州大学医学部药学院
20
207
8.0
13.0
4
张宸
苏州大学医学部药学院
1
0
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传播情况
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节点文献
谷胺酰胺转氨酶
细胞色素c
定点修饰
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国生物工程杂志
主办单位:
中国科学院文献情报中心
中国生物技术发展中心
中国生物工程学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1671-8135
CN:
11-4816/Q
开本:
大16开
出版地:
北京中关村北四环西路33号
邮发代号:
82-13
创刊时间:
1976
语种:
chi
出版文献量(篇)
4896
总下载数(次)
30
总被引数(次)
45351
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