粗糙脉孢菌ERG-11蛋白抗原的原核表达、纯化及其多克隆抗体制备

• 作者: 刘雁霞 李少杰 樊振川
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 粗超脉孢菌ERG-11基因 克隆 蛋白表达及纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 216-222
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0258

摘要

构建pET-28a(+)-ERG-11重组质粒,表达6×His-ERG-11融合蛋白,制备ERG-11多克隆抗体.采用PCR技术扩增目的片段,插入pET-28a(+)原核表达载体,并转入E.coli BL21(DE3)感受态表达融合蛋白,融合蛋白经亲和纯化及分子筛纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,取血清后,采用间接ELISA法和Western blot法检测多克隆抗体的效价及特异性.成功构建了pET-28a(+)-ERG-11表达载体,SDS-PAGE电泳显示成功诱导出以包涵体形式存在的6×His-ERG-11融合蛋白,两步纯化后得到纯度较高的抗原,间接ELISA法显示制备的多克隆抗体效价达到1:512000,Western blot显示具有较高特异性.成功实现了粗超脉孢菌ERG-11蛋白的原核表达,制备出一支兔抗粗超脉孢菌ERG-11的多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李少杰	中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室	8	21	2.0	4.0
2	刘雁霞	天津科技大学大健康生物技术研究所天津市大健康生物技术国际联合研究中心天津科技大学食品工程与生物技术学院	2	4	1.0	2.0
3	樊振川	天津科技大学大健康生物技术研究所天津市大健康生物技术国际联合研究中心天津科技大学食品工程与生物技术学院	7	19	2.0	4.0