促血管生成素-2过表达重组腺病毒载体的构建

• 作者: 李桥川 杨鹏程 韦莉莉
• 来源期刊: 广西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 促血管生成素-2 基因重组 腺病毒 载体 鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 页码范围: 849-851
• 页数: 3页
• 分类号: R349.65
• 字数: 3392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11675/j.issn.0253-4304.2017.06.27

摘要

目的 构建小鼠促血管生成素-2(Ang-2)基因过表达重组腺病毒载体.方法 化学合成小鼠Ang-2编码序列,经PCR扩增、鉴定后连接至穿梭质粒.将含目的基因的重组质粒转化DH5α感受态细胞,所得阳性转化子经电泳分析并测序鉴定.将携带目的基因的穿梭质粒与辅助包装质粒共转染人胚肾细胞系HEK293细胞,反复冻融获取重组腺病毒,终点稀释法测定病毒滴度,重组腺病毒转染HEK293细胞并提取蛋白,采用免疫印迹法分析Ang-2蛋白的表达.结果 PCR产物电泳分析可见大小约1.5 kp的特征性条带,基因序列显示测序结果与GenBank提供的Ang-2序列一致,经 HEK293细胞包装后腺病毒滴度为1×108.8 pfu/ml,免疫印迹法分析可见大小57 kD特征性条带,即重组腺病毒可成功表达Ang-2蛋白.结论 Ang-2基因重组腺病毒载体可成功构建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李桥川	广西医科大学第一附属医院血液内科	33	55	4.0	6.0
2	杨鹏程	广西医科大学第一附属医院血液内科	3	2	1.0	1.0
3	韦莉莉	广西医科大学第一附属医院老年心内科	5	1	1.0	1.0