慢病毒介导的miR194-5p过表达精原细胞株的建立

• 作者: 夏蒙蒙 夏静 牛长敏 王建军 申雪沂 郑英
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微RNAs 慢病毒表达质粒 精原细胞 细胞系
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-15
• 页数: 6页
• 分类号: R321.1
• 字数: 4649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2018.02.002

摘要

目的 构建miR194-5p慢病毒表达载体pMSCV-PIG-miR194-5p,应用包装后产生的慢病毒感染Stra8-GC1-spg细胞,获得稳定过表达miR194-5p精原细胞株.方法 用PCR法扩增miR194-5p的前体序列pri-miR194-5p.利用分子克隆技术构建慢病毒表达载体pMSCV-PIG-miR194-5p.将其与Gag pol和VSV.G辅助质粒一起用PEI法共转染至293T包装细胞内,收集慢病毒上清,后将其感染Stra8-GC1-spg细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达miR194-5p的精原细胞株.结果 构建了慢病毒重组质粒pMSCV-PIG-miR194-5p.经酶切鉴定及DNA测序法证实序列准确无误.经包装产生的慢病毒能成功感染Stra8-GC1-spg细胞,并稳定过表达miR194-5p.结论 成功地构建了慢病毒表达重组质粒pMSCV-PIG-miR194-5p,经包装后产生预计的慢病毒,建立了稳定过表达miR194-5p的精原细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏静	扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室	10	22	2.0	4.0
2	王建军	扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室	81	584	13.0	22.0
3	郑英	扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室	46	87	4.0	7.0
4	牛长敏	扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室	8	12	2.0	3.0
5	申雪沂	扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室	4	4	1.0	1.0
6	夏蒙蒙	扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室	3	3	1.0	1.0