棉花GhV HA-A基因的原核表达及其重组大肠杆菌的抗逆性分析

• 作者: 倪志勇 刘娜 曲延英 李娟 芮存 陈全家
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉花 GhVHA-A基因 原核表达 抗性分析 非生物胁迫
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 41-47
• 页数: 7页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 5772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2018.01.0041

摘要

为进一步验证棉花 GhV HA-A 基因的功能,该研究将棉花 GhV HA-A 基因构建到原核表达载体 pET28a上,利用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,同时对重组大肠杆菌BL21(pET28a-GhV HA-A)进行抗逆性分析.结果表明:(1)半定量RT-PCR分析发现,棉花幼苗液泡膜H+-ATPase基因(GhV HA-A)表达水平受脱水和高盐胁迫诱导.(2)将1872 bp长的编码区序列连接至原核表达载体pET28a上,成功构建了原核表达载体pET28a-GhV HA-A;SDS-PAGE电泳检测结果表明,在70 kD左右处有1条特异表达的蛋白质条带,与预期的目的产物大小一致.(3)重组菌BL21(pET28a-GhV HA-A)的抗逆性分析发现,重组菌对 PEG6000(20%)和NaCl(0.5 mol/L)的抗性明显高于对照菌株BL21(pET28a),表明 GhV HA-A 基因在大肠杆菌中表达后能够增强菌株的抗性.本研究结果为GhV HA-A 基因在植物抗逆基因工程中的应用提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲延英	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	135	726	13.0	19.0
2	陈全家	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	112	621	11.0	21.0
3	李娟	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	21	181	6.0	13.0
4	倪志勇	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	59	287	9.0	14.0
5	刘娜	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	35	67	4.0	7.0
6	芮存	新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室	4	3	1.0	1.0