保加利亚乳杆菌N-乙酰胞壁质酶的原核表达和鉴定

• 作者: 吴家强 张玉玉 王可 苏文政 蒋慧 马建军 黄保华
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 保加利亚乳杆菌 N-乙酰胞壁质酶 原核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术· 遗传育种· 种质资源
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: S879.1|TS252.1
• 字数: 2653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2018.05.003

摘要

为研究保加利亚乳杆菌(LB)N-乙酰胞壁质酶(Mur)的分子生物学特性,根据已发表的保加利亚乳杆菌核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,PCR扩增LB MN株不含跨膜区域序列的mur基因,片段回收后克隆至pMD19-T载体并进行鉴定,再将其亚克隆于原核表达载体pET-30a(+)中构建重组表达质粒pET-30a(+)-mur,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达.SDS-PAGE和Western blot分析显示重组Mur蛋白分子量约为21 kD,能在大肠杆菌中高效表达.