基于密码子优化策略的斑马鱼FOXP3A分子的原核表达及多克隆抗血清制备

• 作者: 张左兵 王兰 陈芳
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 斑马鱼 FOXP3A 密码子优化 原核表达 多克隆抗血清
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 47-52
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 5467字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2019.01.009

摘要

目的:构建斑马鱼FOXP3A融合蛋白的原核表达系统,诱导表达并制备多克隆抗血清.方法:选取斑马鱼foxp3a基因cDNA的894 bp特异区段(s-foxp3a),对该片段进行密码子优化后构建原核表达载体pET-32a-s-foxp3a,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白并纯化,纯化后的蛋白免疫家兔,制备斑马鱼FOXP3A蛋白的多克隆抗血清,4次免疫后取血清,采用间接ELISA法检测抗血清效价.结果:在16℃经0.5 mmol/L IPTG诱导10 h的条件下,SDS-PAGE分析表明斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白以包涵体形式产生;间接ELISA检测结果显示,FOXP3A蛋白多克隆抗血清的效价在1.6×105以上.结论:制备了高效价的斑马鱼FOXP3A多克隆抗血清,为进一步解析斑马鱼FOXP3A蛋白的功能提供了基础工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王兰	山西大学生命科学学院	123	1118	16.0	28.0
2	陈芳	山西大学生命科学学院	11	46	5.0	6.0
3	张左兵	山西大学生命科学学院	6	5	2.0	2.0