小鼠Foxp3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 仝佳 崔大伟 杨先知 毛朝明 王胜军 许化溪 邵启祥 马洁 鲍俊峰
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Foxp3 原核表达 多克隆抗体 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 310-313
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3175字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2008.04.009

摘要

目的:体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体.方法:从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3 全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32a,转化E.coli BL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,Ni2+-NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性.结果:成功构建了Foxp3-pET-32a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶ 20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体特异性与小鼠Foxp3蛋白结合.结论:成功表达小鼠Foxp3蛋白并制备了多克隆抗体.