靶向PRRSV的FnCas9-rgRNA敲除载体构建研究

• 作者: 傅建华 刘彦均 王丙云 肖文 赵姝灿 郑桂纯 陈志胜
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 生物学
• 关键词: FnCas9-rgRNA敲除载体 黄色荧光蛋白 猪繁殖与呼吸综合征病毒 Marc145细胞 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 20-23,176
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.04.0180

摘要

为了检测靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的FnCas9-rgRNA敲除载体是否构建成功,试验先构建FnCas9-rgRNA敲除载体骨架并对其进行测序,然后将黄色荧光蛋白(EYFP)、PRRSV分别与各自的FnCas9-rgRNA敲除栽体转染至HEK293、Marc145细胞内,通过流式细胞仪分析HEK293细胞内的荧光强弱及Marc 145细胞的病变程度,并对FnCas9-rgRNA敲除载体的初步构建、载体活性进行研究.结果表明:FnCas9-rgRNA敲除载体骨架测序正确,流式细胞仪分析显示FnCas9-rgRNA敲除载体对HEK293细胞内EYFP基因的表达产生明显抑制作用,表达荧光的细胞数量明显下降,3种针对PRRSV设计的rgRNA分别与FnCas9表达载体共转染细胞,接种病毒后Marc 145细胞病变程度明显降低.说明靶向PRRSV的FnCas9-rgRNA敲除载体构建方式正确且FnCas9-rgRNA敲除载体具有活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丙云		66	300	10.0	14.0
2	陈志胜		40	131	6.0	9.0
3	刘彦均		2	0	0.0	0.0
4	赵姝灿		5	9	2.0	3.0
5	郑桂纯		5	9	2.0	3.0
6	肖文		2	12	1.0	2.0
7	傅建华		1	0	0.0	0.0