猪圆环病毒3型Rep蛋白的表达与多克隆抗体制备

• 作者: 周玲玲 宋玉伟 张明亮 张杰 王双山 王英杰 连凯琪
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PCV-3 Rep蛋白 包涵体 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 2107-2111
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.11.02

摘要

为研究猪圆环病毒3型(PCV3) Rep基因在大肠杆菌中表达产物的反应原性和免疫原性,本试验对Rep基因进行原核表达和纯化,鉴定表达产物与PCV3阳性血清的反应性;制备重组Rep蛋白的多克隆抗体,Western blot鉴定多克隆抗体与重组Rep蛋白的特异性识别能力,通过ELISA测定多克隆抗体的效价.结果 显示,Rep在大肠杆菌中获得大量表达,且主要以包涵体形式存在,重组蛋白相对分子质量约为32 000,经纯化后得到单一条带.表达的重组Rep蛋白可以与PCV3阳性血清发生反应.制备的大鼠抗Rep血清与表达的重组Rep蛋白发生特异性反应,且效价大于1∶32 000.表明本试验表达的Rep具有良好的免疫原性和反应原性,为PCV3的ELISA诊断试剂盒研制提供依据.