水牛KDM1A/LSD1基因的克隆分析及真核表达载体的构建

• 作者: 俸云 沈朋雷 石德顺 赵鑫 陆凤花
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 水牛 KDM1A基因 克隆分析 真核表达载体构建
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 繁殖生理与胚胎工程专栏
• 页码范围: 14-20,25
• 页数: 8页
• 分类号: S823.2
• 字数: 3894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19556/j.0258-7033.2019-07-014

摘要

本研究旨在对水牛组蛋白去甲基化酶KDM1A基因进行克隆,分析并构建真核表达载体,为研究其在水牛体细胞克隆胚胎中的作用提供基础.首先提取水牛卵巢总RNA,利用RT-PCR技术克隆得到水牛KDM1A基因并对其进行生物信息学分析.结果表明:水牛KDM1A基因编码区全长2625 bp,预测编码874个氨基酸;水牛KDM1A与其他物种同源性较高且与生物分类学保持一致;其所编码蛋白分子式为C2375H3855N805O776S24,理论分子质量为56872.11;其二级结构由19个 α 螺旋,47个 β 折叠,25个T转角和无规则卷曲组成;其高级结构在水牛、黄牛、人之间具有较高的相似性;本实验构建了水牛pcDNA3.1(+)-KDM1A真核表达载体,转染pcDNA3.1(+)-KDM1A可以显著提高水牛耳部成纤维细胞(BFFs)中KDM1A的表达水平;还发现卵母细胞中KDM1A的表达水平显著高于BFFs.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石德顺	广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室	241	1058	14.0	21.0
2	赵鑫	广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室	7	54	4.0	7.0
3	俸云	广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室	3	0	0.0	0.0
4	沈朋雷	广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室	4	1	1.0	1.0