杭菊CHI基因的克隆及原核表达

• 作者: 汪涛 王蕊 程搏幸 邹庆军 郭巧生
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 杭菊 黄酮类化合物 查尔酮异构酶 原核表达 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（14）
• 所属期刊栏目: 分子生药学
• 页码范围: 3015-3021
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20190325.102

摘要

从杭菊转录组数据库中筛选并通过PCR技术成功克隆得到3条杭菊查尔酮异构酶基因(CmCHI)分别命名为:Cm-CHI1,CmCHI2,CmCHI3.生物信息学分析表明:CmCHI1 ～3开放阅读框的碱基数分别为708,633,681 bp分别编码235,210,226个氨基酸.利用原核表达技术成功诱导得到3条30 kDa左右的融合蛋白,同时使用Ni-NTA树脂柱分离纯化得到相应的重组融合蛋白.聚类分析表明,筛选得到的3条CmCHI与菊科植物同源性较高,CmCHI1与CmCHI3属于Ⅰ型CHI;CmCHI2属于Ⅳ型CHI.以β-actin为内参基因,使用RT-qPCR检测并分析CmCHI1～3基因在杭菊中的表达量差异,结果表明CmCHI1,CmCHI3表达量较高,CmCHI2表达量较低;淹水处理能显著促进CmCHI1,CmCHI3基因的表达,而对CmCHI2无调控作用,由此得出Cm-CHI1,CmCHI3是主要参与杭菊黄酮类化合物合成的查尔酮异构酶基因,CmCHI2为辅助基因.以上研究结果为进一步研究CHI基因在杭菊黄酮类化合物代谢中的分子调控机制提供依据,从而为提高杭菊黄酮含量及最终提高杭菊药用品质奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭巧生		284	4374	34.0	46.0
2	邹庆军		9	21	2.0	4.0
3	汪涛		34	434	12.0	20.0
4	程搏幸		9	32	4.0	5.0
5	王蕊		4	14	2.0	3.0