蜡状芽孢杆菌环糊精糖基转移酶的基因克隆表达·酶学特性及定点突变研究

• 作者: 张洪斌 杨静文 胡雪芹 花敬涵
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: β-环糊精糖基转移酶 克隆 表达 定点突变
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 110-115,126
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 6832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2019.05.030

摘要

研究克隆、表达了蜡状芽孢杆菌来源的环糊精糖基转移酶(cyclodextrin glycosyltransferase,CGTase,EC 2.4.1.19)基因,研究了其酶学性质,并在此基础上构建突变菌株以探究关键氨基酸位点与产物特异性的关系.结果表明,重组CGTase的最大比活力达5292 U/mL,分子量约为68 kDa,最适温度和pH分别为55℃和8.5;以淀粉为底物催化合成的主要产物是β-环糊精(β-CD);通过序列对比选取了第47位氨基酸(Ala)进行定点突变,构建了A47R、A47M、A47S、A47Y.研究发现活性区域中第47位氨基酸对于产物特异性和产量具有一定的影响,其中亲水性氨基酸更利于CDs(尤其β-CD)的合成,这为酶法合成β-CD的工业应用提供了方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洪斌	合肥工业大学食品与生物工程学院	59	436	13.0	17.0
2	胡雪芹	合肥工业大学食品与生物工程学院	35	219	9.0	12.0
3	花敬涵	合肥工业大学食品与生物工程学院	1	0	0.0	0.0
4	杨静文	合肥工业大学食品与生物工程学院	1	0	0.0	0.0