ZIKA病毒E蛋白膜外区(E80)的表达、纯化及鉴定

• 作者: 白琴琴 钮利喜
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ZIKA病毒 E蛋白 纯化 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 142-145
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2020.02.010

摘要

目的 构建ZIKA病毒E蛋白膜外区(E80)的原核表达质粒,对重组蛋白E80进行表达、 纯化和鉴定.方法 以重组质粒pCMV-S-ZIKA_ME为模板,利用PCR扩增E80基因片段并将其插入原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-28a-ZIKA-E80,转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,采用Ni+柱亲和层析法纯化蛋白,Western印迹检测蛋白特异性.结果 重组质粒pET-28a-ZIKA-E80经双酶切验证构建正确,且测序结果与原序列一致.E80成功的以包涵体的形式表达,大小为45 kD且与预期一致.亲和层析纯化后纯度达到95％以上,能被ZIKA病毒E蛋白抗体特异性识别.结论 成功构建了能高效表达E80的基因工程菌,纯化后的目的蛋白纯度高、特异性好,为ZIKA病毒疫苗和E蛋白的结构与功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钮利喜	山西大学生物技术研究所教育部化学生物学与分子工程重点实验室	16	60	4.0	6.0
2	白琴琴	山西大学生物技术研究所教育部化学生物学与分子工程重点实验室	1	0	0.0	0.0