真菌病毒FpgMBV1中P3基因的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 刘东伟 张晓婷 李洪连 李轲 王志芳 谢源
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1 P3蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 567-573
• 页数: 7页
• 分类号: S432.41|S432.44
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000503

摘要

采用RT-PCR法从假禾谷镰孢菌(Fusarium pseudograminearum)弱毒菌株FC136-2A的菌丝中扩增出假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1(Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1,FpgMBV1)的P3蛋白编码序列.测序结果显示,FpgMBV1-P3蛋白的编码序列长2 700 bp,编码901个氨基酸残基.构建原核表达载体pET28a-FpgMBV1-P3并转化大肠杆菌BL21 (DE3)菌株,在25℃以0.5 mmol·L-1 IPTG诱导表达重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为90 kDa,与预期分子量大小相符.将该重组蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得抗血清,采用间接ELISA测定其效价达1∶128 000,能够特异性检测到假禾谷镰孢菌菌丝中的FpgMBV1-P3蛋白.研究结果可为探究FpgMBV1-P3的结构和功能,以及进一步探讨FpgMBV1在假禾谷镰孢菌弱毒菌株FC136-2A中的作用机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张晓婷		14	108	7.0	10.0
2	李洪连		148	2274	27.0	40.0
3	李轲		1	0	0.0	0.0
4	刘东伟		1	0	0.0	0.0
5	王志芳		1	0	0.0	0.0
6	谢源		1	0	0.0	0.0