猪细小病毒AV30 VP2基因在昆虫细胞中表达及其免疫原性鉴定

• 作者: ASHENAFI Kiros Wubshe 丁耀忠 代军飞 张杰 李国秀 李茜 马炳
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2基因 昆虫杆状系统 VLP 免疫原性
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 852-860
• 页数: 9页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0065

摘要

本研究选用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统构建含有猪细小病毒AV30未优化、优化后衣壳蛋白VP2基因的重组杆状病毒,感染sf9、HF细胞表达VP2蛋白.首先,扩增PPV AV30得到VP2基因,测序后由公司根据昆虫细胞嗜性进行基因优化.同时构建并收获未优化、优化重组杆状病毒rBacVP2.其感染HF细胞后,进行Western-blot及IFA实验分析表明,未优化、优化VP2蛋白在昆虫细胞中正确表达,分子质量约为64 ku,并具有良好的反应原性.电镜观察,未优化、优化VP2蛋白均自我组装成VLP,与PPV AV30病毒粒子大小形状相似.最后,用VP2-VLP免疫BALB/c小鼠,能刺激小鼠产生抗PPV的特异性抗体.免疫后的小鼠脾脏淋巴细胞在PPV AV30病毒的刺激后,出现显著的增殖情况,同时产生了Th1和Th2型相关细胞因子.本研究成功构建了VP2-VLP,并在小鼠实验中显示了良好的免疫效果,为以VP2为表位载体的嵌合型病毒样颗粒疫苗进一步研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张杰	中国农业科学院兰州兽医研究所	165	1879	22.0	38.0
2	李茜	中国农业科学院兰州兽医研究所	16	141	5.0	11.0
3	丁耀忠	中国农业科学院兰州兽医研究所	5	13	2.0	3.0
4	代军飞	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
5	ASHENAFI Kiros Wubshe	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0
6	李国秀	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0
7	马炳	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0