GH43家族β-D-木糖苷酶RuXyn1在马克斯克鲁维酵母中的表达及其应用

• 作者: 余垚 吕红 周峻岗 李雪莹 段懿桐
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 木聚糖 β-D-木糖苷酶 表达载体 马克斯克鲁维酵母 重组表达
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 页码范围: 599-607
• 页数: 9页
• 分类号: Q36|Q814
• 语种: 中文

摘要

木聚糖的降解需要内切β-木聚糖酶和β-D-木糖苷酶的协同作用,β-D-木糖苷酶能将β-木聚糖酶的水解产物木寡糖降解为木糖,因此在半纤维素的利用中具有重要的意义.本研究将中国牦牛瘤胃微生物来源的糖基水解酶GH43家族β-D-木糖苷酶基因RuXyn1克隆到含两种不同分泌信号肽(菊粉酶信号肽和α-factor信号肽)的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)分泌表达载体(pUKDN132和pUKDN129)中,转化K.marxianus Fim-1 ura3A,通过筛选获得两株分泌表达β-D-木糖苷酶基因RuXyn1的重组菌株Fim-1/pUKDN132-RuXyn1和Fim-1/pUKDN129-RuXyn1.重组菌株摇瓶培养72 h后,上清液中β-D-木糖苷酶酶活分别为0.304 U/mL和0.045 U/mL.在5L发酵罐高密度发酵中,Fim-1/pUKDN132-RuXyn1分泌表达的β-D-木糖苷酶酶活为1.75 U/mL,而Fim-1/pUKDN129-RuXyn1的酶活为1.6 U/mL,表明在表达β-D-木糖苷酶RuXyn1时,菊粉酶信号肽介导的分泌效率优于α-factor信号肽.以玉米芯为底物,我们测试了K.marxianus重组表达的β-D-木糖苷酶RuXyn1的降解效果,发现在商业化的β-木聚糖酶和纤维素酶CTec2中,添加β-D木糖苷酶RuXyn1能够显著提升玉米芯的降解效率,还原糖产量提高7％,木糖和葡萄糖的产量分别提高12.4％和6.1％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周峻岗		10	33	3.0	5.0
2	吕红		30	130	6.0	10.0
3	余垚		11	18	2.0	4.0
4	李雪莹		3	0	0.0	0.0
5	段懿桐		2	0	0.0	0.0