PCV4 SYBR Green I实时荧光定量PCR方法的建立及应用

• 作者: 杜倩 赵子欣 辛佳亮 邹联斌 郑敏 闫修魁 闭璟珊 韦正吉 韩知晓 黄小武
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒4型 SYBR Green I实时荧光定量PCR 快速检测
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 109-113
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.10.021

摘要

为建立一种灵敏、可快速检测猪圆环病毒4型(PCV4)的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,根据PCV4 Rep基因的保守区域设计引物,建立针对PCV4的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行评价.结果 显示,该检测方法的Ct值与标准品在5.64×102～5.64×109 copies/μL范围内呈良好的线性关系,R2为0.999,斜率为-3.638,检测下限为5.64×102 copies/μL,且无非特异性扩增.利用该方法对56份临床样品进行检测,发现PCV4核酸阳性率为3.57％,比普通PCR更灵敏可靠.结果 表明,本试验建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法可用于PCV4的快速诊断.