食品中椰毒假单胞菌酵米亚种实时荧光PCR检测的研究

• 作者: 尹丹韩 方陈玉 林捷 王加胜 赵奇琦 陆晶芳
• 来源期刊: 食品安全质量检测学报
• 关键词: 椰毒假单胞菌酵米面亚种 实时荧光PCR TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 本期专题:食品安全快速检测技术
• 页码范围: 3538-3544
• 页数: 7页
• 字数: 4146字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立食品中椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法.方法 根据椰毒假单胞菌酵米面亚种16S～23S rRNA基因片段序列,用Oligo7设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,摸索最佳退火温度,最佳引物和探针浓度,建立椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法.通过对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌以及22种其他标准菌株进行实时荧光PCR检测,验证本法的特异性和抗干扰性.同时从菌液浓度和DNA浓度水平上进行研究,确定该检测方法的灵敏度.结果 用该方法检测23种菌,除唐菖蒲伯克霍尔德氏菌外,其他22种细菌均为阴性.抗干扰性试验显示杂菌对检测结果不影响,本法抗干扰能力强.通过灵敏度试验的研究,确定本法检测椰毒假单胞菌酵米面亚种的菌液灵敏度为1×102 CFU/mL,DNA灵敏度为250 fg/μL.结论 本试验设计的引物和探针具有较强特异性、抗干扰性以及灵敏度,该方法具有很好的研究价值和应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆晶芳		2	0	0.0	0.0
2	林捷		3	2	1.0	1.0
3	尹丹韩		2	2	1.0	1.0
4	方陈玉		2	2	1.0	1.0
5	赵奇琦		2	2	1.0	1.0
6	王加胜		3	0	0.0	0.0