非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白的原核表达及其免疫特性研究

• 作者: 谢振华 刘英楠 张萌 敖清莹 吕璐 于婉琪 扈荣良 邬静 陈鸿军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 C-type lectin蛋白 抗体 免疫特性
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 37-44
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0017

摘要

为了制备非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type lectin重组蛋白.用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备C-type lectin蛋白多抗,利用Western-blot和间接免疫荧光技术鉴定该抗体的反应性和特异性.结果表明,原核表达重组蛋白C-type lectin经IPTG诱导表达成功,大小约为38 ku,其主要以包涵体形式表达,且能与His标签单抗发生反应,C-type lectin蛋白多抗可特异性识别非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白.本研究为非洲猪瘟血清学检测方法的建立及C-type lectin蛋白生物学功能的探究奠定了基础.