副粘病毒融合蛋白活性位点中亮氨酸基因突变分析

• 作者: 王志玉
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 副粘病毒 融合蛋白 细胞融合 亮氨酸 基因
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 12-16
• 分类号: R373|Q754
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2000.01.003

摘要

为了确定副粘病毒融合蛋白(F)分子上活性位点中亮氨酸在F的细胞融合作用中的作用,弄清F融合细胞的分子机理,采用基因定点突变法创造一个酶切位点,用酶切反应初步筛选突变株,然后用DNA序列分析进一步确定,并在真核细胞内进行表达,Giemsa染色和指示基因法检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测表达效率.结果表明,hPIV3 F第460位亮氨酸(L)和第474位异亮氨酸(I)分别突变成丙氨酸(A)(L460A和I474A)时,细胞融合功能分别只相当于野毒株的51.24%和48.73%;而第467位L和第481位L分别突变成A(L467A和L481A)时,细胞融合功能则无明显改变;当第460和467位L同时突变成A(L460A～L467A)时,细胞融合功能降低了79.13%;而第474位I和第481位L同时突变成A(I474A～L481A)时,细胞融合功能无明显改变.NDV F第481位L和第488位L分别突变成A(L481A和L488A)时,细胞融合功能分别降低了75.22%和80.04%;将二者共同突变时,则进一步降低,只有野毒株的10.13%.各突变株的表达效率没有改变.说明F分子上与HN相互作用的特异性区域中的亮氨酸在细胞融合中发挥着重要作用,即hPIV3F第460位L和第474位I,NDV第481和488位L,突变后细胞融合作用不同程度下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志玉	山东医科大学病毒学研究室	5	42	4.0	5.0