基因重组人HSC73在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 杨耀琴 杨虎川 陈斌 陶惠红
• 来源期刊: 上海铁道大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因重组 热休克类似蛋白73 大肠杆菌 人
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1-3,10
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0392.2000.05.001

摘要

目的用基因工程方法表达人的热休克类似蛋白73(HSC73)并提纯HSC73蛋白,为研究该蛋白提供条件.方法用人HSC73基因构建原核细胞表达载体pETHSC73,在大肠杆菌BL21中用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,ATP亲和层析法提取HSC73.经SDS-PAGE、3.a.3抗体Western blot作ECL检测.结果人HSC73基因构建的载体pETHSC73能很好地在大肠杆菌表达出分子量为73kD的蛋白,蛋白提取方法能有效提纯表达的蛋白,用3.a.3抗体作Western blot检测证实该蛋白具有人HSC73抗原特性.所得蛋白质氨基酸测定和N端测序的结果与有关报道的一致.结论人2.1 kb的HSC73基因片段构建的高表达载体能够很好表达人HSC73,用ATP亲和层析法可以有效提纯有活性的人HSC73.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨虎川	上海铁道大学医学院肿瘤细胞研究室	4	9	2.0	3.0
2	杨耀琴	上海铁道大学医学院肿瘤细胞研究室	4	9	2.0	3.0
3	陈斌	上海铁道大学医学院肿瘤细胞研究室	4	9	2.0	3.0
4	陶惠红	上海铁道大学医学院肿瘤细胞研究室	3	9	2.0	3.0