猪生长激素cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 叶星 李新辉 白俊杰 简清 罗建仁
• 来源期刊: 华中农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪生长激素cDNA 基因克隆 大肠杆菌表达
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 99-102
• 页数: 4页
• 分类号: S828.2|Q78
• 字数: 2242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2421.2001.02.001

摘要

用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法，从猪脑垂体总RNA中扩增出编码猪生长激素(GH)成熟肽基因序列，定向克隆至质粒pUC18。序列分析表明，克隆的猪GH cDNA长573bp，不含信号肽序列，并在该序列之前加入一起始密码子ATG。将猪GH cDNA定向克隆至原核表达载体pBV220，构建成重组猪GH基因表达载体pBVpGH7。SDS-PAGE和薄层扫描分析表明：经42℃诱导，pBVpGH7在大肠杆菌中可表达一分子量约22000的特异蛋白，表达量约占细胞总蛋白的20.5％。