IA-2基因的克隆及原核表达研究

• 作者: 丁伟 刘优萍 宗阳 罗敏 蔡东升 谢超 金群燕 陈刚 陈源
• 来源期刊: 中华内分泌代谢杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 自身抗原 基因表达 IA-2
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 糖尿病自身抗体研究研究
• 页码范围: 21-23
• 页数: 3页
• 分类号: R587
• 字数: 3087字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1000-6699.2001.01.007

摘要

目的　应用基因工程技术获取足量且具有免疫活性的IA-2重组蛋白，为建立IA-2抗体检测方法奠定基础。方法　通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法从小鼠脑组织RNA中扩增编码IA-2胞内结构域的cDNA，构建表达型重组质粒，经DNA序列分析确证后，在大肠杆菌中表达，用亲和层析纯化融合目的蛋白，并以斑点印迹技术(Dot blot)鉴定其免疫原性。结果　所获特异PCR产物正确重组至Pinpoint Xa-1表达载体中。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核表达及亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约56　　000的融合目的蛋白，表达量约1 mg蛋白/升菌液，且表达产物与谷　氨酸脱羧酶抗体阳性的糖尿病患者血清及健康对照血　清发生的显色反应差异有显著性(P＜0.05)。结论　原核表达的IA-2融合蛋白具有免疫学活性，可用于糖尿病患者血清中相关抗体的检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢超		2	4	2.0	2.0
2	罗敏		54	591	13.0	22.0
3	蔡东升		7	81	4.0	7.0
4	丁伟		8	107	4.0	8.0
5	陈刚		23	123	6.0	10.0
6	宗阳		4	37	2.0	4.0
7	金群燕		2	4	2.0	2.0
8	陈源		9	76	5.0	8.0
9	刘优萍		3	40	2.0	3.0