以硅藻土和纺织品为载体,采用吸附法制备固定化脂肪酶,研究了固定化假丝酵母99-125脂肪酶在有机溶剂中催化脂肪酸低碳醇酯酯化合成过程中,有机溶剂性质、脂肪酸与低碳醇的结构、pH值、反应温度和体系含水量、低碳醇的抑制作用等因素对酯化过程的影响.试验结果表明:底物低碳醇需要采用流加方式加入体系,石油醚是最适宜的有机溶剂,脂肪酸与醇的碳链越长,越易于酯化;固定化脂肪酶对直链醇的选择性优于支链醇.以石油醚为有机溶剂,在反应温度为 40℃、pH值为7时,硬脂酸与甲醇的酯化率达95%;反应后期应除去体系中的水以避免酶失活.固定化酶间歇催化油酸与甲醇的酯化时,重复使用15次 (每次24 h),其操作半衰期约为360 h.