幽门螺杆菌临床菌株hpaA基因的克隆和表达及鉴定

• 作者: 严杰 李立伟 毛亚飞
• 来源期刊: 浙江大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 hpaA基因 碱基序列 克隆,分子 HpaA融合蛋白/免疫学
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: R377|R392.2
• 字数: 2702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2003.01.003

摘要

目的:克隆幽门螺杆菌(Hp)hpaA基因,构建hpaA基因表达载体,鉴定其表达的融合蛋白免疫性.方法:采用高保真PCR从幽门螺杆菌临床分离菌株Y06中扩增hpaA基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a的hpaA表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达,采用Hp全菌抗体的Western blot和兔抗融合蛋白血清的免疫扩散试验鉴定其免疫性.结果:所克隆的hpaA基因与报道的相应核苷酸序列同源性为94.25%～97.32%,氨基酸序列同源性高达95.38%～98.46%.pET32a-hpaA-BL21DE3系统的HpaA融合蛋白表达量高达细菌总蛋白的40%左右.HpaA融合蛋白能与Hp全菌抗体发生结合反应,免疫家兔能获得高效价抗体.结论:本研究成功地构建了Hp hpaA高效表达系统,所表达的HpaA融合蛋白有良好的免疫原性和免疫反应性,可作为Hp疫苗的抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学教研室	265	1149	14.0	20.0
2	毛亚飞	浙江大学医学院病原生物学教研室	41	232	9.0	12.0
3	李立伟	浙江大学医学院病原生物学教研室	34	277	7.0	15.0