草莓果实特异表达基因annfaf在E.coli中的表达及抗血清的制备

• 作者: 夏然 方宏筠 杨怀义 王关林 那杰
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: annfaf基因 蛋白表达 抗血清制备
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 140-143
• 页数: 4页
• 分类号: Q93|S668
• 字数: 3281字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2003.02.006

摘要

将草莓(Fragaria ananassa Duch.)果实中特异表达的膜联蛋白基因annfaf的cDNA连接重组到pET-30a质粒中,构建了融合和非融合蛋白表达载体.annfaf基因转化大肠杆菌(E.coli)后以包含体形式得到了高效表达,同时研究了annfaf基因表达的影响因素.实验结果表明,最佳培养温度是37℃,培养时间为4 h,当培养液中加入利福霉素时可明显提高表达量中目的蛋白的含量.SDS-PAGE检测表明该蛋白分子量为35 kD,与目的蛋白相同.以表达的蛋白作抗原免疫家兔,制备了抗Annfaf蛋白的抗血清.ELISA检测及Western印迹表明,制备的抗血清可与其免疫抗原发生特异的免疫学反应,且具有较高的效价.该实验结果为进一步研究Annfaf蛋白在草莓果实细胞中的定位及其生理功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王关林	辽宁师范大学生命科学学院	91	2324	26.0	44.0
2	方宏筠	辽宁师范大学生命科学学院	47	1523	22.0	38.0
3	那杰	辽宁师范大学生命科学学院	29	171	6.0	12.0
4	杨怀义	中国科学院微生物研究所	22	297	9.0	17.0
5	夏然	辽宁师范大学生命科学学院	3	34	2.0	3.0