IV型胶原片段阻滞原的基因克隆及原核表达研究

• 作者: 傅建新 白霞 阮长耿
• 来源期刊: 苏州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 阻滞原 胶原 分子克隆 重组蛋白 血管新生抑制物
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: R394-33|R73-3
• 字数: 2847字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2003.01.002

摘要

目的克隆中国人阻滞原基因并高效表达.方法利用高保真聚合酶链反应(HF-PCR)从胎肝细QSD胞克隆IV型胶原α1链NC1结构域编码序列,即阻滞原基因,并进行序列分析.将阻滞原基因克隆入表达载体pQE-31,转化大肠杆菌M15[pREP4]并用IPTG诱导蛋白表达,蛋白电泳鉴定重组阻滞原蛋白.结果从胎肝细胞克隆的人阻滞原基因长687bp,编码229个氨基酸;大肠杆菌表达的重组阻滞原N-末端与载体编码的组氨酸标签形成融合蛋白;SDS-PAGE分析显示,经IPTG诱导后可出现28kd的目的蛋白条带,最高可占总菌体蛋白的32%.结论该法可成功克隆阻滞原基因,将有助于肿瘤血管抑制疗法的深入研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮长耿	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	188	746	13.0	17.0
2	白霞	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	58	167	6.0	8.0
3	傅建新	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	30	157	7.0	11.0