抗人P185erbB2的scFv-Fc融合蛋白的表达及免疫功能分析

• 作者: 于鸣 冯建男 孙瑛勋 施明 沈倍奋 解志刚 郭宁
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Her2/neu scFv 融合蛋白质
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 371-374
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

为提高鼠源单抗用于体内治疗的效应功能及降低入抗鼠抗体反应,将编码抗入P185erbB2单抗轻、重链可变区(VL、VH)融合构建的单链抗体(scFv)基因片段与人IgG1的Fc区基因片段融合构建了scFv-Fc融合基因,并将其克隆到哺乳动物细胞表达载体pCIDN中.用重组载体转染CHO细胞,通过G418筛选获得稳定高表达克隆.更换无血清培养基培养,经重组蛋白质A亲和层析柱纯化scFv-Fc融合蛋白.融合蛋白质在还原SDS-PAGE中表现为52 kD的条带;与SK-BR-3细胞裂解液共培育可特异性地沉淀出P185erbB2蛋白;FACS分析表明融合蛋白质识别P185erbB2蛋白的胞外段;ELISA测定融合蛋白质对细胞表面抗原P185erbB2的亲和常数为7.5×10-10(mol/L)-1.构建scFv-Fc融合基因,将其克隆到表达载体,进一步稳定表达抗P185 erbB2的scFv-Fc融合蛋白,为进一步的体外、体内研究鼠源单抗治疗效果创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈倍奋	军事医学科学院基础医学研究所	213	1497	18.0	31.0
2	郭宁	军事医学科学院基础医学研究所	42	318	8.0	17.0
3	施明	军事医学科学院基础医学研究所	29	122	7.0	9.0
4	于鸣	军事医学科学院基础医学研究所	38	185	8.0	12.0
5	孙瑛勋	军事医学科学院基础医学研究所	14	84	5.0	8.0
6	冯建男	军事医学科学院基础医学研究所	12	25	2.0	3.0
7	解志刚	军事医学科学院基础医学研究所	6	19	3.0	4.0