重组纳豆激酶的分离纯化及酶学性质的初步研究

• 作者: 冯建成 李洁 杨艳燕 石衍君 许芳
• 来源期刊: 湖北大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 纳豆激酶 大肠杆菌 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 57-60
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2004.01.016

摘要

将已构建好的表达载体pTYB102转化大肠杆菌,经IPTG诱导,表达出以可溶形式存在的有活性的纳豆激酶.首先对表达条件进行优化,最佳诱导温度是15 ℃,最佳诱导时间是10 h.然后将离心收集到的菌体通过超声波破碎、硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100柱层析以及冷冻干燥等步骤进行分离纯化,得到电泳纯的有溶栓活性的纳豆激酶.冷冻干燥品在SDS-PAGE上呈一条蛋白质带.纯化倍数35倍,纯酶比活1 147.54.该酶的最适反应条件是45 ℃,pH 8.0.酶活性在pH 6.0～11.0,55 ℃以下稳定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨艳燕	湖北大学生命科学学院	52	731	16.0	26.0
2	许芳	湖北大学生命科学学院	5	94	5.0	5.0
3	李洁	湖北大学生命科学学院	17	111	6.0	10.0
4	石衍君	湖北大学生命科学学院	4	47	3.0	4.0
5	冯建成	湖北大学生命科学学院	5	75	4.0	5.0