马铃薯转化酶抑制子St-inh cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达和功能测定

• 作者: 宋波涛 成善汉 柳俊 谢从华
• 来源期刊: 实验生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯 转化酶抑制子 St-inh 克隆 功能测定
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 269-275
• 页数: 7页
• 分类号: S5
• 字数: 5024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-520X.2004.04.003

摘要

用RT-PCR结合5'RACE方法从马铃薯(Solanum tuberosum L.)栽培种JH块茎中克隆了转化酶抑制子St-inh全长cDNA.序列分析表明,St-inh基因编码区全长663bp,编码221个氨基酸.将含St-inh基因cDNA的DNA片段克隆到pET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功实现了表达.基因表达产物与马铃薯栽培品种(系)E1、JH试管块茎以及番茄果实的转化酶提取物共孵育结果显示,转化酶活性分别下降了34.3%、21%和33.8%,说明St-inh的翻译产物具有转化酶抑制子功能.BLAST基因序列分析表明,St-inh与Kunitz-type C类基因序列同源性达95%以上,T-COF-FEE氨基酸序列对比分析显示,该基因编码的蛋白质具有典型的Kunitz-type结构域[L,I,V,M]-X-D-X-[E,D,N,T,Y]-[D,G]-[R,K,H,D,E,N,Q]-X-[L,I,V,M]-X(5)-Y-X-[L,I,V,M],因此,St-inh基因可能为Kunitz-type家族成员.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋波涛	国家蔬菜改良中心华中分中心华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	2	26	2.0	2.0
2	柳俊	国家蔬菜改良中心华中分中心华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	3	68	3.0	3.0
3	谢从华	国家蔬菜改良中心华中分中心华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	3	68	3.0	3.0
4	成善汉	国家蔬菜改良中心华中分中心华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室	1	8	1.0	1.0