人MAGE-1基因的克隆、原核表达及其抗体的制备

• 作者: 叶菁 宋宏萍 张秀敏 陈广生 隋延仿 黄亚渝
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤抗原-1 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 259-262
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2004.04.004

摘要

目的获得MAGE-1蛋白,制备其多克隆抗体.方法采用RT-PCR方法从人肝细胞癌HepG2中克隆MAGE-1基因,构建其原核表达质粒,并进行原核表达与蛋白分离纯化.免疫动物,制备MAGE-1的抗血清.经固化GST蛋白的Sepharose 4B交叉吸收后,采用琼脂双扩实验和ELISA方法检测其效价和特异性.结果所得MAGE-1 cDNA序列与GeneBank中公布的一致.构建了MAGE-1 194-309aa片段的原核表达质粒pGEX-MAGE-1,经诱导及分离纯化,得到一M,约42000的融合蛋白.免疫动物,分离血清,经交叉吸收后,琼脂双扩及ELISA实验结果显示多克隆抗体能够与MAGE-1蛋白特异性结合.结论本研究成功地获得MAGE-1蛋白,制备的抗MAGE-1多克隆抗体,经交叉吸收后能够特异性地与MAGE-1蛋白结合,为研究MAGE-l在肿瘤诊断和免疫治疗中的应用提供了实验条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	隋延仿	第四军医大学基础部病理学教研室	88	384	10.0	13.0
2	张秀敏	第四军医大学基础部病理学教研室	53	243	8.0	11.0
3	黄亚渝	第四军医大学基础部病理学教研室	28	78	5.0	6.0
4	陈广生	第四军医大学基础部病理学教研室	46	197	8.0	10.0
5	叶菁	第四军医大学基础部病理学教研室	79	357	10.0	13.0
6	宋宏萍	第四军医大学基础部病理学教研室	22	154	6.0	12.0