酒类酒球菌mleP基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达

• 作者: 何秀萍 刘延琳 张博润 蒋思欣 郭雪娜
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 酒类酒球菌 苹果酸通透酶基因 克隆与表达 酿酒酵母
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 465-468
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2758字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2004.04.012

摘要

苹果酸通透酶具有协助苹果酸-乳酸发酵(MLF)的重要功能.以酒类酒球菌(Oenococcus oeni)优良菌系Oenococcus-Lee-SD-2a的总DNA为模板,用PCR方法克隆到苹果酸通透酶基因mleP,构建了重组质粒pBMmleP.序列分析表明克隆到的基因序列与已报道的序列同源性为99%.为使目的基因在酿酒酵母中表达,以大肠杆菌-酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,构建了重组表达质粒YEpmleP,并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS58.酵母转化子用含有亮氨酸、组氨酸和色氨酸的YNB平板筛选鉴定.获得的转化子在添加了L-苹果酸(5g/L)的培养基中培养4d;取培养液上清用HPLC检测,结果显示重组转化子YSP的培养液中L-苹果酸剩余含量均低于空载体转化子YS352,因此所得酵母重组转化子对苹果酸的转运能力有所提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何秀萍	中国科学院微生物研究所	53	769	15.0	25.0
2	蒋思欣	中国科学院微生物研究所	11	80	6.0	8.0
3	张博润	中国科学院微生物研究所	71	1224	18.0	31.0
4	刘延琳	西北农林科技大学葡萄酒学院	74	878	15.0	27.0
5	郭雪娜	中国科学院微生物研究所	23	326	10.0	17.0