口蹄疫病毒O/China/99株VP1基因植物种子特异性表达载体的构建及农杆菌的导入

• 作者: 孙元 张永光 方玉珍 潘丽 王宝琴 王文秀 王永录 王炜 蒋守田 谢庆阁
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 组成型表达载体 种子特异性表达载体 根癌农杆菌
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 413-417
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4290字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.06.001

摘要

根据植物组成型表达质粒pBin438的限制性酶切位点及FMDV VP1的核苷酸序列设计并合成引物,从种子特异性启动子7S质粒pU8-2质粒中扩增7S启动子,经HindⅢ和BamHⅠ酶切,与经同样双酶切的植物组成型表达载体pBin438大片段连接,经酶切、PCR鉴定及序列分析,种子特异性表达载体p7SBin438构建完成.从FMDV VP1基因的pGEM-VP1质粒中扩增VP1基因,经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,与p7SBin438质粒酶切后的大片段连接,经酶切、PCR及测序鉴定,FMDV VP1基因已置于种子特异性启动子7S下游,成功构建了FMDV VP1基因的种子特异性表达载体p7SBin438-VP1.通过三亲交配法,将表达载体p7SBin438-VP1导入根癌农杆菌,为研究FMD可饲疫苗奠定了基础.