β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 廖贵芹 张桂敏 李春华 马立新
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因组文库 β-1 4-内切葡聚糖酶基因 大肠杆菌表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 275-279
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2966字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2005.03.021

摘要

运用选择性培养基LBCMC从环境土样中分离得到一株能利用羧甲基纤维素的芽孢杆菌Bacillus sp.NW-2004a,并运用"鸟枪"克隆法构建了其基因组文库,且从此基因组文库中筛选得到两个阳性克隆.对其中一阳性克隆中插入的DNA片段(命名为GLUD)进行序列测定,发现了一长度为2 502 bp的开放阅读框(ORF),可编码834个氨基酸.BLAST分析结果表明,该基因与Bacillus sp.KSM-S237来源的纤维素酶基因AB018420具86 %相似性,所编码的多肽与Bacillus sp.KSM-64来源的β-1,4-内切葡聚糖酶具89 %的相似性,故该基因是一新发现的β-1,4-内切葡聚糖酶基因.该序列已收录于Genebank,登录号AY663839 .另外,以CpoI and NotI限制性内切酶双酶切衍生于质粒pGEX的大肠杆菌表达载体pHBM625,然后将经T4 DNA polymerase处理后的β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆至载体pHBM625中得到重组质粒pHBM625Glu,最后通过平板检测及SDS-PAGE凝胶电泳,均检测到该基因在大肠杆菌XL10-Glod中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张桂敏	湖北大学生命科学学院	41	239	9.0	13.0
2	马立新	湖北大学生命科学学院	77	616	14.0	21.0
3	李春华	湖北大学生命科学学院	7	102	6.0	7.0
4	廖贵芹	湖北大学生命科学学院	2	32	2.0	2.0