白蚁内切-β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达、纯化及酶学性质的研究

• 作者: 庞宗文 张建珍 杜丽琴 秦国梅 韦宇拓 黄日波 黄艳燕
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 内切-β-1 4-葡聚糖酶 台湾家白蚁 酿酒酵母
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 30-38
• 页数: 9页
• 字数: 4838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2009.05.006

摘要

提取了台湾家白蚁总RNA并反转录获得cDNA,PCR扩增出白蚁内切葡聚糖酶的基因,并将目的基因分别克隆到大肠杆菌和酿酒酵母载体中,构建了产内切-β-1,4-葡聚糖酶的基因工程菌.由于大肠杆菌会有少量的泄漏表达,而所用的酿酒酵母表达载体是本实验室构建带有INU信号肽的表达载体,故都可采用刚果红平板染色法筛选具有羧甲基纤维素酶(CMCase)活性的重组转化子.利用金属镍亲和层析对大肠杆菌表达的内切-β-1,4-葡聚糖酶进行纯化,CMC酶活检测显示纯化酶的最适温度和最适pH值分别为42 ℃、6.5;内切-β-1,4-葡聚糖酶的Vmax为0.071 mg/mL·min,Km值为80.2712 mg/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜丽琴	广西大学生命科学与技术学院	33	117	7.0	9.0
2	韦宇拓	广西大学生命科学与技术学院	83	584	14.0	20.0
3	黄日波	广西大学生命科学与技术学院	84	623	14.0	19.0
7	庞宗文	广西大学生命科学与技术学院	56	403	11.0	17.0
8	张建珍	广西大学生命科学与技术学院	7	23	3.0	4.0
9	秦国梅	广西大学生命科学与技术学院	3	8	2.0	2.0
10	黄艳燕	广西大学生命科学与技术学院	3	11	2.0	3.0