枯草芽孢杆菌C36内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达

• 作者: 吴振芳 吴琦 官兴颖 胥兵 陈惠
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 克隆 内切葡聚糖酶基因 表达 序列
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 分类号: Q781|Q785
• 字数: 3394字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2009.03.013

摘要

以自行分离筛选出的天然枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) C36的染色体DNA为模板,PCR扩增得到含有内切葡聚糖酶基因的DNA片段,将其克隆到pMD18T载体中,序列分析表明,克隆得到的DNA片段全长1 602 bp,编码一个含有499个氨基酸的多肽.与其他芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因序列比对,其核苷酸同源率为90%～93%,其编码的氨基酸序列的同源性在90%～98%,已将此基因注册GenBank(DQ782954).将含内切葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切后,与相同酶切的表达载体pET32a相连接,并导入大肠杆菌BL21中表达.蛋白质电泳实验结果表明在6.47×104处有表达蛋白带.经测定表达蛋白比酶活力达99.02 U/mL,为出发菌C36(63.78 U/mL)的1.55倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴琦	四川农业大学生命科学与理学院	109	1300	21.0	31.0
2	陈惠	四川农业大学生命科学与理学院	108	1021	19.0	26.0
3	胥兵	四川农业大学生命科学与理学院	8	140	6.0	8.0
4	官兴颖	四川农业大学生命科学与理学院	4	72	3.0	4.0
5	吴振芳	四川农业大学生命科学与理学院	6	66	4.0	6.0