携带人肝细胞生长因子基因重组腺病毒的构建与制备

• 作者: 劳妙芬 吕同德 吴彬 吴祖泽 哈小琴 王澜
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞生长因子 基因 腺病毒 构建 制备
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|R543.5
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2005.02.001

摘要

构建一种携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(Ad-HGF),并对其进行扩增、纯化与质量检测.首先构建携带人肝细胞生长因子基因的穿梭质粒pXCJL-CMV/pA-HGF,然后用LipofectAMIN介导该质粒和含有E1、E3区及包装信号区缺失的复制缺陷型5型腺病毒基因组的质粒GT4050共转染293细胞,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺病毒(Ad-HGF).并以噬斑分析法筛选单克隆重组腺病毒,PCR法鉴定阳性重组腺病毒,氯化铯密度梯度离心法纯化病毒,紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度,快速CPE分析、噬斑分析法测定病毒感染滴度(pfu/ml).采用敏感细胞病变法检测有复制能力的腺病毒.结果成功构建了重组腺病毒Ad-HGF,制备的病毒纯度好、滴度高,其效价比小于1:100,并且未检测到有复制能力的腺病毒存在.研究构建制备的重组腺病毒Ad-HGF具有潜在的实际应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴祖泽	军事医学科学院放射医学研究所	153	1469	18.0	31.0
2	哈小琴	兰州军区总医院实验科	118	351	8.0	12.0
3	吕同德	兰州军区总医院实验科	83	291	8.0	13.0
4	劳妙芬	军事医学科学院放射医学研究所	10	102	5.0	10.0
5	吴彬	军事医学科学院放射医学研究所	8	32	3.0	5.0
6	王澜	军事医学科学院放射医学研究所	9	37	3.0	5.0