SARS病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的高效表达

• 作者: 乔军 夏咸柱 常爽 杨松涛 郑明光 高玉伟 黄耕
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: SARS病毒 N蛋白基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 331-334,343
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5684.2005.03.024

摘要

对SARS病毒核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定.根据GenBank中已发表的SARS全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对SARS病毒N蛋白基因进行了RT-PCR扩增.将PCR产物纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-N,进行核苷酸序列测定.结果该基因全长1269bp,编码422个氨基酸.与Tor2、Urbani和TW1株相比,核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性均为100%.将pGEM-N双酶切,回收目的基因片段并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-N;将其转化表达菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE结果表明:重组菌可表达相对分子量约为53 kD的蛋白.Western-biotting证实,重组N蛋白可以与SARS免疫血清发生特异性反应.经凝胶薄层扫描分析,重组N蛋白表达量约占菌体蛋白的43%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨松涛	军事医学科学院军事兽医研究所	49	267	9.0	13.0
3	高玉伟	军事医学科学院军事兽医研究所	31	171	7.0	11.0
4	夏咸柱	军事医学科学院军事兽医研究所	61	402	11.0	15.0
5	常爽	吉林大学农学部	10	53	5.0	7.0
8	乔军	军事医学科学院军事兽医研究所	5	24	3.0	4.0
9	黄耕	军事医学科学院军事兽医研究所	8	60	5.0	7.0
10	郑明光	吉林大学农学部	1	1	1.0	1.0