细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响

• 作者: 易萍 李力 王华 邓兵
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单细胞 PCR 细胞裂解
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 分子、生化遗传学与PCR技术
• 页码范围: 27-28,32
• 页数: 3页
• 分类号: R349.82
• 字数: 2393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9534.2005.02.012

摘要

目的研究细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响,寻求较好的细胞裂解方法.方法应用显微分离技术分离单个淋巴细胞,分别使用冻融变性和蛋白酶K裂解法处理单细胞,应用多重PCR同时扩增X染色体特异重复序列(DXZ1)和Y染色体特异重复序列(DYZ1)对单细胞进行性别诊断,比较其扩增效率.结果使用显微操作法获得80个男性淋巴细胞.采用冻融变性处理单细胞,40个淋巴细胞经多重PCR扩增后有32个产生DXZ1和DYZ1两条电泳带,正确率为80%.采用蛋白酶K裂解法,40个淋巴细胞经多重PCR扩增后均产生DXZ1和DYZ1两条电泳带,正确率为100%.两者的扩增效率有显著的差异性(χ2=6.81,P<0.01).结论 Rechitsky等的蛋白酶K裂解法比较简便,费时短,扩增效率高,适合细胞裂解及PCR扩增模板的制备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	325	2225	23.0	32.0
2	王华	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	48	241	7.0	13.0
3	邓兵		55	429	9.0	19.0
4	易萍	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	59	283	9.0	13.0