重组Gallinacin-3的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 乔彦良 李朝阳 赵建增
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸡 β-防御素 大肠杆菌 融合蛋白 抑菌作用
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告·检测技术
• 页码范围: 1-4,34
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3859字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1280.2006.02.001

摘要

防御素是昆虫、植物和动物体内抗感染及激发特异性抗感染免疫的重要抗菌肽.Gallinacin-3(gal-3)可能是鸡体内最重要的β-防御素,但它的功能还未得到研究证实.本试验从鸡黏膜表皮组织中克隆了gal-3编码基因,并在大肠杆菌中成功表达了gal-3与谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白.经IPTG诱导后,融合蛋白的产量占细菌总蛋白的33.6%左右,主要以包涵体形式存在.用亲合层析技术从大肠杆菌裂解液中纯化出可溶性重组蛋白,并用酶切除目标蛋白的融合伴侣.抑菌试验发现,重组gal-3-GST融合蛋白在未去除融合伴侣时,就与游离的gal-3有着相同的抑菌活性,对沙门氏肠炎杆菌和志贺氏痢疾杆菌的最小杀菌浓度在20μg/mL(相当于约4μg/mL纯gal-3)左右,与其他物种β-防御素的活性相当.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李朝阳		9	50	4.0	7.0
2	乔彦良		40	151	8.0	11.0
3	赵建增		2	23	2.0	2.0