Memo蛋白的融合表达和纯化

• 作者: 丁丽华 叶棋浓 宁康 张浩 李杰之 李熔 王晓辉 范洪学
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: Memo蛋白 克隆 融合表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 560-562
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.04.021

摘要

目的:一些临床预后较差的恶性肿瘤一般具有很高的转移性和侵袭性,近来的研究表明,Memo蛋白与恶性肿瘤的这些特性有十分密切的关系.本研究拟克隆、融合表达和纯化Memo蛋白.方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增Memo蛋白编码序列,并将其以正确相位与pGST载体中的GST编码序列融合,构建成重组质粒pGST-Memo.将此重组质粒转化大肠杆菌DH5α后,用谷胱甘肽-Sepharose 4B纯化融合蛋白,并用Western印迹检测融合蛋白的表达.结果:构建了Memo蛋白的融合表达载体,并在大肠杆菌DH5α中得到表达,经谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析获得了纯化的GST-Memo融合蛋白.Western印迹检测表明,此蛋白可与GST抗体反应.结论:Memo蛋白的克隆、融合表达和纯化,为进一步研究恶性肿瘤的转移性、侵袭性及其相关机理提供了有用的材料.