牛分枝杆菌Ag85B基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 何昭阳 姜秀云 王春凤 王春芳
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛分枝杆菌 Ag85B基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 51-54
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|S852.61
• 字数: 4951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2006.01.016

摘要

以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板,根据已发表的Ag85B成熟蛋白基因的核苷酸序列设计合成特异性引物进行PCR扩增,获得约860 bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T载体中,成功地构建出克隆载体pGEM-T-85B.以BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-T-85B和pET28a(+),并将纯化的Ag85B基因亚克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达载体pET28a-85B.将pET28a-85B转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30 000的外源蛋白带.Western blot分析发现,该蛋白具有牛分枝杆菌抗原性,从而为进一步研究Ag85B的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何昭阳	吉林农业大学动物科技学院	56	624	14.0	23.0
2	王春芳	吉林农业大学动物科技学院	33	111	6.0	8.0
3	姜秀云	吉林农业大学生物技术学院	42	147	7.0	9.0
4	王春凤	吉林农业大学动物科技学院	134	596	12.0	16.0