采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1的真核细胞系

• 作者: 吴雄文 房崇芸 曾梦华 朱珉 李荣 王树森 王璐 谢林 陈实
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 可溶性人类白细胞抗原G1 核转染 真核细胞系
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 异体及异种移植
• 页码范围: 1130-1133
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3276字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G1)的真核细胞系.方法 采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-Ⅰ类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达.结果 采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%.RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白. 结论 通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系.